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大鼠肝内胆管上皮细胞
大鼠肝内胆管上皮细胞
Product Introduction
1.产品名称:大鼠肝内胆管上皮细胞
2.组织来源:肝脏组织
3.产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
大鼠肝内胆管上皮细胞分离自肝脏组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。通过控制激素调控的分泌和吸收,在保持、调整和扩大胆小管的结构中发挥重要作用,肝内胆管上皮细胞在先天性和获得性免疫应答方面起着积极作用。肝内胆管上皮细胞约占肝细胞总数的5%,其在肝内胆道系统内形成复杂的网状管形结构。肝内胆管上皮细胞具有复杂的生理代谢功能,参与肝脏的代谢、排泌、免疫等生理过程,在肝脏疾病的发生发展过程中起一定的作用。研究表明,常见的肝内胆管病变例如原发性硬化性胆管炎、胆管癌等疾病,都是以肝内胆管上皮细胞为病变靶位,进而引起肝内胆管上皮损伤。因此,了解正常肝内胆管上皮细胞的生物学特征和病变肝内胆管上皮细胞的病理特征对研究肝内胆管病变的发病机制、诊断和治疗具有重要意义。
本公司生产的大鼠肝内胆管上皮细胞采用胶原酶灌注消化法后,再用胶原酶-DNA酶联合消化,接种至预先包被鼠尾胶原的培养瓶中,通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定,纯度可达80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息:
M199、FBS、上皮细胞生长添加剂、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
同时,YBio还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测,保证细胞纯度在90%以上;同时也需经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。 

二.使用方法 

1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作: 

取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置4-6小时或过夜,以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。 

2、细胞传代: 

1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次; 

2)添加0.125%胰蛋白酶消化液约2ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm/min,离心5min; 

3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 

4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。

3、细胞冻存: 

1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次; 

2)添加0.125%胰蛋白酶消化液约2ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后轻轻吹打细胞使之脱落,再加入完全培养液终止消化,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm/min,离心5min; 

3)用适当量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=7:2:1)重悬细胞,并放置于冻存管中; 

4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。 

    

4、细胞复苏: 

1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁; 

2)将冻存管中的细胞移至15ml无菌离心管中,滴加入完全培养液5ml混匀细胞,然后将细胞悬液转移至适当面积大小的培养皿中; 

3)放置于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 

4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。 

  

三.注意事项 

1、培养基于4℃条件下可保存3-6个月; 

2、在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作; 

3、原代培养的细胞,不建议多次传代后进行实验。如果您的实验时间较长, 请在收到细胞后传代时,按细胞量分种2瓶,使用其中的一瓶细胞实验,其余的细胞先冻存起来。下次实验需要时,再复苏; 

4、该细胞只可用于科研



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