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小鼠表皮角质形成细胞
小鼠表皮角质形成细胞
Product Introduction
1.产品名称:小鼠表皮角质形成细胞
2.组织来源:皮肤组织
3.产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
小鼠表皮角质形成细胞分离自皮肤组织;表皮位于动物皮肤的外层,由胚胎时期外胚层形成,具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构,由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层,即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。表皮角质形成细胞是一种能合成角质蛋白的上皮细胞,此类细胞为表皮的主体,由表皮深层始逐渐增殖、分化,并在成为角化的角质细胞中,细胞核与细胞器完全消失,细胞亦失去生理功能而脱落。未脱落部分对机体尚有保护作用,故不必在洗擦身体时用力搓擦,使其过早脱失。表皮角质形成细胞主要分布于表皮基底层,在上皮程序性死亡后,细胞产生角化并移向表皮。体外培养的表皮角化细胞容易导致终末分化,不能充分增殖。角质形成细胞最终产生角质蛋白,在其向角质细胞演变过程中,一般可以分为四层,即基底层、棘层、颗粒层以及角质层。有人把前三层或前二层称为生发层或马尔匹基层。此外,在某些部位,特别在掌跖部位,角质层下方还可见到透明层。
本公司生产的小鼠表皮角质形成层细胞先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞纯度可达80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息:
F12、bFGF、Insulin、Transferrin、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

同时,YBio还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测,保证细胞纯度在90%以上;同时也需经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。 

二.使用方法 

1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作: 

取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置4-6小时或过夜,以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。 

2、细胞传代: 

1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次; 

2)添加0.125%胰蛋白酶消化液约2ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm/min,离心5min; 

3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 

4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。

3、细胞冻存: 

1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次; 

2)添加0.125%胰蛋白酶消化液约2ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后轻轻吹打细胞使之脱落,再加入完全培养液终止消化,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm/min,离心5min; 

3)用适当量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=7:2:1)重悬细胞,并放置于冻存管中; 

4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。 

    

4、细胞复苏: 

1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁; 

2)将冻存管中的细胞移至15ml无菌离心管中,滴加入完全培养液5ml混匀细胞,然后将细胞悬液转移至适当面积大小的培养皿中; 

3)放置于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 

4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。 

  

三.注意事项 

1、培养基于4℃条件下可保存3-6个月; 

2、在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作; 

3、原代培养的细胞,不建议多次传代后进行实验。如果您的实验时间较长, 请在收到细胞后传代时,按细胞量分种2瓶,使用其中的一瓶细胞实验,其余的细胞先冻存起来。下次实验需要时,再复苏; 

4、该细胞只可用于科研;



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