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pHIL-S1
| 质粒类型: | 毕赤酵母表达载体 |
|---|---|
| 表达水平: | 高拷贝 |
| 启动子: | AOX1 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 8260 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | 5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´； |
| 3' 测序引物及序列: | 3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´ |
| 载体标签: | N-PHO1分泌信号肽 |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 筛选标记: | HIS4 |
| 备注: |
利用PHO1信号肽，分泌表达蛋白。
|
pHIL-S1载体的详细信息如下： • pHIL-S1载体大小8,260 bp，是融合表达载体。 • 载体构建过程中，可供使用的单一限制性内切酶位点为Xho I, EcoR I, Sma I, BamH I. • 利用PHO1分泌信号肽，分泌表达蛋白基因。 • 在载体构建过程中，你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。 • 毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。 • 为了将基因插入GS115或KM71的AOX区, 使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型) •为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型) •将基因插入GS115的AOX1区域，需要使用Bgl II线性化质粒 (产生His+MutS基因型)。
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