BL21 Star(DE3) 热敏感受态细胞

BL21 Star(DE3) Chemically Competent Cell

产品规格:

BL21 Star(DE3) 10×100μl

pUC19(control vector) 10pg/μl 10μl

基 因 型

F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm rne131 (DE3)

简 要 说 明

High5TM系列 BL21 Star(DE3)感受态细胞来源于 BL21(DE3)菌株，含有 rne131 基因突变体，

rne131 突变基因能够增强菌株细胞内 mRNA 的稳定性，从而提高蛋白表达能力。

主要适用于 T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达。 High5TM系列 BL21 Star(DE3)

感受态细胞由特殊工艺制作，经 pUC19 质粒检测转化效率达 107cfu/μg。

1. 取 100μl 冰上融化的 BL21 Star(DE3)感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置 25 分钟。

2. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌培养基(2YT 或 LB)，混匀后 37℃，200rpm 复苏 60 分钟。

4. 5000rpm 离心一分钟收菌，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或

LB 培养基上。

操 作 说 明

5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。

1.感受态细胞最好在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 诱导时，IPTG 浓度可选（0.1-2mM 均可）。

5. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间、温度以及 IPTG 浓度需实验者优化。

产品优势

1、蛋白表达：适合表达非毒性蛋白

2、效率高：可达到 107cfu/ug pUC19 DNA

3、稳定性好：-70 度冰箱可保存 6 个月时间

保存条件： -80℃