GV3101 化转农杆菌感受态细胞

GV3101 Chemically Competent Cell

产品规格:

GV3101 10×100μl

pCAMBIA2301（control vector） 10ng/ul 10ul

基 因 型

C58 (rif R) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) ( gentR/strepR) Nopaline

简 要 说 明

GV3101 菌株为 C58 型背景，核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因 rif，为了便于转化

操作，此菌株携带一无自身转运功能的胭脂碱型 Ti 质粒 pMP90 (pTiC58DT-DNA)，此质粒含有 vir 基因

（vir 基因是 T-DNA 插入植物基因组必需的元件，pMP90 (pTiC58DT-DNA)质粒自身的 T-DNA 转移功能

被破坏，但可以帮助转入的双元载体 T-DNA 顺利转移）。

pMP90 (pTiC58DT-DNA)型 Ti 质粒含有筛选标签：Strep 和 gent，赋予 GV3101 菌株链霉素和庆大霉素

抗性，适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作，经 pCAMBIA2301 质粒检测转化效率可

达 10

4cfu/μg。

1. 取-80℃保存的  农杆菌感受态于冰上待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。

2. 每 100μl 感受态加 1ug（体积不大于 10ul）质粒 DNA，用手拨打管底混匀，依次于冰上静置 5 分钟、

液氮 5 分钟、28℃水浴 5 分钟、冰浴 5 分钟。

3. 加入 700μl 无抗生素的 LB 或 YEB 液体培养基，于 28℃振荡培养 2~3 小时。

操 作 说 明

4. 6000rpm 离心一分钟收菌，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 LB 或 YEB

平板上，倒置放于 28℃培养箱培养 2-3 天（当平板只含有 50ug/ml kan 时，28℃培养 48h 即可；平板

中同时加入 50ug/ml kan，20ug/ml rif 时，需 28℃培养 60h；如果使用的平板含有 50ug/ml rif 则需要

28℃培养 72-90h）。

1. 感受态细胞最好在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

产品优势

1、蛋白表达：适合表达非毒性蛋白

2、效率高：可达到 107cfu/ug pUC19 DNA

3、稳定性好：-70 度冰箱可保存 6 个月时间

保存条件： -80℃