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柱式DNA清除剂
柱式DNA清除剂
Product Introduction

柱式DNA清除剂

名称 编号 规格 价格 手册
柱式DNA清除剂 YB-037R 50次 990元

英文名称:

运输:常温

保存:常温

有效期:1年

货期:现货

其他:

产品介绍:

过柱法去除RNA样品中的DNA

产品及特点
本产品是的非酶DNA清除剂-2的柱式升级产品,可用于细胞总RNA样品中基因组DNA污染的去除。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。开发的柱式非酶DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有比非酶DNA清除剂-2操作上更快速的特点。
1. 操作更加简单快速,全部操作只需要几分钟。
2. 回收率高达80%以上。
3. 高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平,而RNA分子完整性不受任何影响。
4. 本身不含RNase污染。
5. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-freeDNase的运输和长期保存必须在低温进行。
6. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。
使用及效果
将含DNA污染的RNA与本产品溶液A按1:1的比例混合后,充分振荡后,加9倍体积溶液B,混匀后转移到离心吸附柱并离心半分钟,弃穿透液,用通用洗柱液洗离心柱1-2次,后用RNA洗脱液洗脱即得去除DNA污染的RNA。

产品及特点

由于血液富含RNase,因此血液RNA非常容易降解,是临床分子生物学研究中的一个棘手的问题。为解决此问题,本公司在非冻型组织RNA保存液的基础上,开发了本产品,它具有下列特点:

1. 能快速渗透到新鲜血液细胞内,抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常温可放置3天,4℃可放置5天,-20℃可放置3个月。

2. 操作简单,直接将本产品和新鲜血液细胞沉淀按比例混合即可。

3. 适用于人新鲜血和哺乳动物新鲜血液,不适用于陈旧血液和冻凝血液,也不适用于禽类血液和其他动物血液。

4. 重复性好,效果跟进口同类产品相当。

5. 保存的样品可直接用本公司血液RNAout提取RNA。

使用及效果

将本产品与新鲜血液样品按4:1的比例(4份本产品加1份新鲜血液)混合后即可放置。放置结束后将样品转移到离心管中,5000 g室温离心1分钟,小心吸出浅粉红色的上清液,棕红色沉淀(血细胞和蛋白沉淀)直接用于后续的总RNA提取。

1. 新鲜细胞:如果试剂没有问题,且外源性污染也可以排除,那么降解几乎都来自裂解液的用量不足。如果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞,一定要使裂解液能覆盖住细胞。

2. 新鲜组织:某些富含内源核酸酶的样品(如肝脏,胸腺等),即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免RNA的降解。更可靠的方法是:在液氮条件下将组织研碎,并且匀浆时使用更多裂解液。

3. 冷冻样品:样品取材后应立即置于液氮中速冻,然后移至-70℃冰箱保存。样品决不能未经液氮速冻而直接保存于-70℃冰箱中。冷冻样品,即使是冷冻细胞,如果不在液氮条件下研磨碎,而直接加入裂解液中匀浆,RNA也比新鲜样品更容易降解。样品在与裂解液充分接触前决不能出现融化,所以研磨用具必须预冷,在碾磨过程中要及时补充液氮。样品研碎后,在液氮刚刚挥发完时,将样品迅速转移到含裂解液的容器中,立即混匀匀浆。

4. 外源RNA酶的污染:试剂,器械及实验环境中的RNA酶进入实验系统,可考虑华越洋产品:外源RNA酶清除剂(RNase remover)解决。

5. 内源RNA酶的污染:抑制剂失效或者用量不够,实验样品过多;匀浆时温度过高。

RNA提取得率低

1. 该组织或者细胞中RNA含量偏低:不同细胞和组织中RNA的丰度不同,如肝脏,胰腺,心脏等是高丰度组织(总RNA含量2-4μg/mg),脑,胚胎,肾脏,肺,胸腺,卵巢等是中丰度组织(总RNA含量0.05-2μg/mg),膀胱,骨,脂肪等是低丰度组织(总RNA含量<0.05μg/mg)。

2. 组织起始量太少或者太多:样品量过少,则细胞组织中RNA含量较低;样品量过多则可能超过裂解液的裂解能力,裂解将不完全,从而导致RNA得率低。




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