柱式病毒RNA-DNA双提试剂盒（柱式病毒DNA-RNAout）

名称	编号	规格	价格	手册
柱式病毒RNA-DNA双提试剂盒（柱式病毒DNA-RNAout）	YB-059R	50次	1190元

英文名称：

运输：常温

保存：常温

有效期：1年

货期：现货

其他：

产品介绍：

柱式法同时提取病毒DNA和RNA

产品及特点 本产品是在天泽基因柱式病毒 DNAOUT 的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品及拭子（咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等）中提取微量病毒 DNA和 RNA 的产品，它具有下列特点：

1. 本产品可用于病毒 RNA、病毒 DNA 提取以及 DNA 和 RNA 双提取。

2. 操作简单，整个过程只需要 20 分钟左右。

3. 灵敏度高，通过 PCR 检测到的最终灵敏度可以达到 30-50 拷贝/mL。

4. 安全无毒，不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。

5. 与 PCR 和荧光 PCR 兼容。所得 DNA 可用于 PCR、酶切等实验；RNA 可用于RT-PCR 和 Northern 杂交等实验。

6. 价廉物美，性价比远高于国外同类产品。

7. 适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。

规格及成分

成份 大扁盒包装

柱式病毒 DNA-RNA 双提取溶液 A 30 mL

离心吸附柱 50 套

通用洗柱液 50 mL

RNA 洗脱液 10 mL

使用手册 1 份

运输及保存 常温运输及保存，有效期一年。

自备试剂 无，但需要自备 RNase-free 的 1.5 mL 离心管（耗材）。

使用方法 1. 对于液体病毒样品：在 1.5 mL 离心管中加入 0.1-0.2 mL 液体病毒样品。如果病毒需要富集，可以将 1.5 mL 液体在 4℃ 24,000 g 冷冻离心 60 分钟，移弃1.3 mL 后剩下的 0.2 mL 用于第 2 步处理。对于拭子样品：将一个拭子放入离心管中，加入 1mL 自备的生理盐水，振荡器上充分振荡半分钟后转移 0.2 mL 到 1.5 mL 塑料离心管中，用于第 2 步处理。

2. 加入 0.6 mL 溶液 A 到第一步得到的 0.2 mL 样品中，振荡 30 秒混匀后室温放置 10 分钟。注意：溶液 A 在 4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。

3. 加入 0.8mL 上柱结合液到离心管中，颠倒混匀后转移一半的混合液（0.8mL）到离心吸附柱中，室温放置 2 分钟。

4. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集上柱结合液 40 mL

5. 将剩余溶液短暂离心后全部转移到步骤 3 的离心吸附柱中，室温放置 2 分钟。

6. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。

7. 加入 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000 rmp 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。

8. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟（干甩），弃含穿透液的离心管。

9. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的 RNase-free 的 1.5 mL 离心管中，在离心吸附柱的滤膜的中部加入 30-100 μL 洗脱液，然后室温放置 2 分钟。

10. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟，离心管中的溶液即为病毒 DNA 和 RNA 溶液。

11. 所得溶液可以直接用于 PCR、RT-PCR 等实验，也可放-20℃长期保存备用。相关资料 常见人类疾病相关 DNA 病毒病毒全称 简称 疾病名称 类型 长度(kb)

hepatitis B Virus HBV

hepatitis type

B ss/dsDNA 3.2

herpes simplex virus HSV encephalitis DNA 3.8

human papilloma

virus

HPV warts dsDNA 6.8~8.4

human T-cell

leukemia virus 1

HTLV-1 leukemia DNA 8.5

adenovirus AdV gastroenteritis dsDNA 34

varicella-zoster virus VZV chicken pox dsDNA 125

human herpes virus-6 HHV-6 oral herpes dsDNA 170

Epstein-Barr virus EBV

Burkitt's

lymphoma

dsDNA

175

常见人类疾病相关 RNA 病毒

病毒 简称 疾病名称 类型 长度(Kb)

Measles virus MV measles ssRNA 4.5~85

Hepatitis A Virus HAV hepatitis type A ssRNA 7.5

Poliomyelitis virus PV polio ssRNA 7.8

Rubella virus RV German measles ssRNA 7.9

Hepatitis C Virus HCV hepatitis type C ssRNA 9.3~9.4

Human

immunodeficiency

virus

HIV AIDS ssRNA 9.7

Dengue Virus DV dengue ssRNA 11

Yellow fever virus YFV yellow fever . ssRNA 11

Rabies virus RV rabies ssRNA 11.9

Influenza A virus IAV influenza ssRNA 13.5

Mumps virus MuV mumps ssRNA 15.4

Ebola virus EBV

virus

hemorrhagic

fever

ssRNA 19

疑难解答 Q：提取液体样品/病毒核酸(RNA 或 DNA)为何很难？

A：原因一是量少。病毒颗粒中的 RNA 或 DNA 是作为遗传物质保存，每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种 RNA 分子，每种 RNA 有很多拷贝)，同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一)，样品中病毒数往往又不是很多，使得样品中病毒核酸的绝对量往往比一个细胞中核酸的绝对量还少，所以操作中十分容易丢失。另外，由于得到的核酸绝对量很少，不能使用电泳和测 OD 检测，只能通过 PCR 或 RT-PCR 检测，而 PCR 或 RT-PCR 的条件又需要优化，所以要确定提取是否成功十分不容易。