非酶RNA清除剂1.0

名称	编号	规格	价格	手册
非酶RNA清除剂1.0	YB-097D	1.5 mL	590元

本品为非酶法质粒RNA和蛋白质污染的去除试剂，专用于从碱变性法纯化的质粒中去除其中的绝大部分RNA污染和大部分蛋白质污染。
产品特点：
1.高效，能去除质粒粗提物中80%左右的RNA污染和60%的蛋白污染。而常用的RNase或LiCl处理只能去除RNA，不能去除蛋白质污染。
2.快速，整个过程只需要十余分钟，不需要37℃保温。
3. 经过本产品处理过的样品，由于没有RNA和蛋白质的干扰，使用硅胶膜或其他吸附离心法吸附、回收质粒DNA的效率比没处理过的样品更高。
4. 价格不到RNase A的1/2，在质粒的大规模制备时成本优势更加明显。
5. 制备临床用(如基因治疗)的质粒DNA时，可以减少后期在临床报批、生产、质检和使用中的很多麻烦(使用生物来源的RNase A和蛋白酶时，容易带入对人体有害的内毒素、LPS等污染物)。
储存条件：常温运输和保存，有效期一年。
使用方法：
一、从碱变性澄清液中去除RNA和蛋白质
1. 将约1/5体积的RNA Scavenger加入到碱变性澄清液中(加溶液III后离心得到的上清液一般是450μl，所以需要加入50μl)。
2. 混匀后室温放置10分钟。
3.室温8000g离心10分钟。
4.转移上清到一新的离心管中，后续处理跟经典的方法一样(即加入等体积的异丙醇或两倍体积的乙醇,混匀后室温离心10分钟,弃上清液后用1mL 75%乙醇洗一次,短暂离心，去掉残留液体,加入适量TE缓冲液溶解质粒待用)。
二、从质粒粗提液中去除RNA和蛋白质
1、将1/4体积的RNA Scavenger-1直接加入到已经溶解在TE或其他溶解液的质粒DNA中。
2、混匀后室温放置10分钟。
3、室温8000g离心10分钟。
4、转移上清到一新的离心管中，加入等体积的异丙醇或两倍体积的乙醇。
5、混匀后室温离心10分钟。
6、弃上清液后用1mL 75%乙醇洗一次。
7、短暂离心，去掉残留液体。
8、加入适量TE缓冲液溶解质粒待用。
使用效果：

图注：用经典的碱变性法从1.5mL E.coli过夜培养液中提取的pGEM-3质粒粗提物(加溶液ⅡI离心上清)经过RNA Scavenger处理后(LA+RNA Scavenger)与未经处理的样品(AL)电泳比较。上样量为1/5。

图注：用经典的碱变性法提取的pGEM-3质粒DNA溶于TE中后，经过RNA Scavenger处理的(+)与未经处理的(-)样品进行电泳比较。处理过的样品失去80%左右的RNA。
疑难解答：
Q：电泳检测质粒DNA时也需要将其RNA污染去掉吗?
A：是。否则RNA 将结合大部分的EB溶液,使质粒DNA的带型减弱。
Q：RNA Scavenger-1跟RNA Scavenger-2 有何区别？
A：
1. RNA Scavenger-2处理过的样品不再需要醇/盐沉淀处理，而RNAScavenger-1处理的样品还需要醇/盐沉淀去除RNA Scavenger-1；
2. RNA Scavenger-2与柱式硅胶膜纯化方法兼容，而RNA Scavenger-1 不兼容；
3. RNA Scavenger-2 不但可以用于去除质粒DNA的RNA污染，还可以用于去除基因DNA的RNA污染，而RNA Scavenger-1只能用于质粒DNA样品。