超快核酸电泳液

产品及特点 SuperBuffer-2 是基因在 SuperBuffer 基础上开发的 DNA/RNA 两用快速电泳液。它跟 SuperBuffer 一样，能以高达 30 V/cm 的电压电泳，达到快速电泳的目的。跟 SuperBuffer 不同的是，本产品对盐离子浓度敏感度低，同时还能用于

RNA 电泳。其主要优点是:

1. 快速，电泳时间短, 对分辨率要求不高的电泳（如 PCR 和酶切检测等）甚至可以在 5-10 分钟内完成。

2. 不影响后续的 Southern 杂交，DNA 胶回收和 DNA 连接等反应。

3. 价格与 TBE(干粉)相当甚至更便宜。

4. DNA 胶回收率高于使用 TAE 和 TBE 电泳的胶回收。 规格及成分 成份 20 L 包装 50 L 包装SuperBuffer-2 70 克 180 克

使用手册 1 份 1 份

运输及保存 常温保存和运输，有效期两年。 自备试剂 蒸馏水

使用方法 一：溶液的配制

将本产品全部加到一个干净的容量适当的容器中，按下表的用量加入蒸馏水并在室温下用磁力搅拌器搅拌，直到干粉完全溶解(一般需要 30 分钟左右)。

20 L 干粉 50 L 干粉

配法一(配制 20X 浓缩液)

加水 1 升得到

20×浓缩液

加水 2.5 升得到

20×工作液

配法二(直接配制工作液)

加水 20 升得到

1×工作液

加水 50 升得到

1×工作液

注：其他浓度的浓缩液配制可以按比例计算，但浓缩液浓度不能超过 20X，否则干粉不能全部溶解。由于干粉含多种未彻底混合均匀的成份，所以必须一次性全部用于溶液的配制。如果缓冲液(浓缩液或工作液)长时间不用，最好灭菌后放 4℃长期保存。

二: DNA 电泳

将 SuperBuffer-2 浓缩液用蒸馏水稀释到 1X，除了需要使用较高电压才能得到快速的电泳结果外，操作跟使用 TAE 和 TBE 基本一样。需注意的地方是：

1. 电压：在 SuperBuffer-2 溶液中既可以使用常规电压，也可以使用较高电压，只是使用常规电压时，其快速的优越性就体现不出来。使用较高电压时，由于各电泳槽结构不同，最佳电压需要稍做摸索。第一次最好将工作电压调到最高电压的 80%左右，即平均 25 V/cm（电极距离）。对一般 minigel，一般可以用250-350V 跑 5-10 分钟；对大的电泳槽，可用 400-450V 跑 5-10 分钟。每次

根据电泳结果和缓冲液温度决定各电泳槽的最佳工作电压和时间。一般电压越高，电泳时间越短。若在电泳时发生电流或电压逐渐下降的现象，请检查电泳仪是否设置了电流上限或功率上限。缓冲液电泳次数超过 3 次或缓冲液中有细菌/真菌生长也会出现此现象，需要更换新的缓冲液。

2. 胶浓度：建议将琼脂糖凝胶的浓度控制在 0.8%左右，对于长度在 100 bp 以下的 DNA 片段，可以将琼脂糖凝胶的浓度提高到 1.2%左右。由于每次溶胶过程中会丢失水份，所以最好在溶胶后适当补充水份（可以前后称重），否则胶浓度会逐渐增加，DNA 的移动速度会减低、产热会增加。使用 0.8%左右的琼脂糖凝胶的好处是一方面可以节约胶的用量，另一方面可以使 DNA 的泳动速度更快，同时还能够提高 DNA 的回收率。

3. 染色：如果使用 EB，最好把染料加入到融化后的凝胶中（只是 EB 的终浓度最好为 0.4 -0.5 ug/mL，比使用 TAE 和 TBE 时稍高），但也可以加入到电泳缓冲液中或/和电泳上样液中。如果使用天泽基因低毒染料绿如蓝（DNAGREEN），最好将染料加入到融化后的凝胶中。如果只有胶中有染料，则长时间电泳后（超过 20 分钟），大部分染料在高压下会与 DNA 分离，DNA 条带可能会看不见或看起来很淡，此时应该再染色一次。在染色液中加入一定的量的 NaCl（终浓度≥0.05 mol/L）能提高染色效果。SuperBuffer-2 与 SYBR Green I 也有良好的兼容性，可以结合使用。

4. DNA 条带扭曲：DNA 样品中所含 SDS 量过高时（SDS 主要来于上样液），DNA条带将出现扭曲，影响实验效果。建议使用不含 SDS 的上样液。

5. 反复使用：1X SuperBuffer-2 电泳液至少可以重复使用 2-3 次，如果使用大电泳槽，可以重复使用的次数会更多。

6. TAE 和 TBE 胶：已经用 TAE 和 TBE 电泳液配置好的琼脂糖凝胶可以直接放入1X SuperBuffer-2 电泳液中按上述电泳条件电泳，但有时候会有扭曲现象。

三：RNA 电泳

跟 DNA 电泳一样，必须在使用前用水将 SuperBuffer-2 溶液稀释到 1X，其使用方法跟 DNA 电泳的主要区别是：

1. 电压：RNA 电泳时，最高使用电压大约只有 DNA 最高使用电压的一半左右，所以一般 minigel 可以使用 150 V 左右的电压。由于各实验室电泳槽规格各异，第一次电泳时，最好将工作电压调到跟 MOPS 电泳一样的电压，每次再逐渐往上调电压和时间，根据电泳结果和测定缓冲液的温度决定今后的工作电压。

2. RNA 上样液：RNA 必须与含变性剂的 RNA 上样液混合，并在 80℃保温 10 分钟后冰浴 2-5 分钟再上样。不能直接将 RNA 样品上样或使用 DNA 上样液，否则电泳不但很难得到清晰的条带，并且在加样孔中还会有看似 DNA 污染的条带出现。推荐使用基因生产的 RNA 变性/上样/染色三合一即用型溶液RNAON。

3. 胶浓度：RNA 电泳最好使用 1%-1.5%的琼脂糖凝胶，用 1X SuperBuffer-2配制。

4. 染色：同 DNA 电泳。 技术资料