Human Fibronectin 人纤维连接蛋白

产品信息

产品描述

细胞纤连蛋白（fibronectin，FN）是一种细胞外糖蛋白，分别以可溶形式存在于体液中，或以不可溶形式存在于细胞外基质中。作为主要的细胞粘附分子之一，FN在许多重要的生理过程中起着关键性作用，如胚胎生成，伤口愈合，止血和血栓形成。纤连蛋白表达的改变，降解以及组合与大量的病理发生密切相关，包括癌症和纤维化。

FN一般以二聚体形式分泌，各个单体的分子量为220-250 kDa。主要由成纤维细胞、内皮细胞、软骨细胞、神经胶质细胞和肌细胞等合成，并分布在周围。器官移植会激发一系列的免疫级联反应，FN在T细胞活化过程表现为激活因子。所有FN由同一个基因编码产生，因转录后的mRNA经组织特异性的不同切割方式生成不同的翻译产物。FN上的多个结构域能与胶原、纤维蛋白、肝素和特异性细胞膜受体结合。其中广为人知的结合域是Arg-Gly-Asp 序列（RGD），为整合素识别后调控细胞粘附。FN参与体内众多生理作用和功能，如各种细胞间的吸附和迁移，细胞骨架组装，酪氨酸磷酸化和肿瘤转移等。

纤连蛋白（FN）的应用：1）作为细胞培养基质；功能在于促进细胞生长，提高细胞贴壁率，增强细胞代谢水平，缩短细胞生长时间；杂交瘤技术中提高细胞融合率等。2）疾病诊断和治疗；功能在于伤口修复和愈合，癌症诊断和治疗，治疗血管系统和心脑血管疾病等。

本品以冻干粉形式供货，产品稳定性高，易运输。经验证HBsAg阴性，HIV和HCV抗体检测阴性。

产品性质

运输和保存方法

冰袋运输。粉末置于4℃保存，不可冻存！有效期至少12个月。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存液配制

将本品取出回温至室温，可用无菌去离子水配制成1mg/mL的储存液，30 min内使其充分溶解混匀。

【注】切勿快速搅拌以及旋涡震荡。配置的储存液分装于-20℃冻存，保质期2周。

推荐使用浓度：用于培养板包被推荐浓度1-5 µg/cm²生长培养基面积；作为培养基添加组分推荐使用浓度为5 µg/mL。

包被流程

本方案仅作参考，具体包被条件需要根据细胞培养体系进行优化。

1）用无血清培养基（不含Ca²⁺、Mg²⁺）或合适缓冲液（pH7-9）充分稀释本品至所需要浓度，以5 µg/cm²的包被浓度为例，可将人纤维连接蛋白储存液稀释至50 ug/mL，35 mm培养板加入1 mL，60 mm加入3 mL稀释液即可。

【注】由于HFN保存缓冲液中含有CAPS组分，将其溶解后向其加入的培养基或缓冲液中如果含Ca²⁺和/或Mg²⁺，会导致不可溶的金属羟化物的形成。

2）加入适量人纤维连接蛋白工作液到细胞板表面。

3）室温孵育1h；

4）吸除多余溶液；

5）用无菌去离子水轻洗培养板，避免划伤皿底。

6）置于4℃备用。