Hieff ® Smearase

产品信息

产品描述

Hieff ^® Smearase是针对高通量测序平台设计的新一代酶切试剂。本品采用高质量的片段化酶，酶切效果稳定，偏好性低，可有效降低片段化的时间和成本，摆脱了繁琐的超声步骤，让片段化过程变得更加简单高效。

产品组分

运输与保存方法

冰袋运输。

-20℃保存，有效期1年。

注意事项

1. 本试剂盒兼容范围为1 ng – 1 μg Input DNA。应尽可能使用A260/A280 = 1.8-2.0的高质量Input DNA。

2. 若Input DNA中引入高浓度金属离子螯合剂或其他盐，可能会影响后续实验，建议将DNA稀释在ddH2O或不含EDTA的10 mM Tris Buffer (pH 7.5-8.0)中进行片段化，EDTA耐受范围为0-2 mM。

3. 对于常规的高质量基因组DNA，酶切时间参考表1。本试剂盒片段化偏好低，耐受各种GC含量的模板。

表1 常规基因组DNA片段化时间推荐表

【注】：以上为推荐时间，需客户在自己的实验体系中进行微调，以达到最佳效果。

4. 参考表1片段化时间可将DNA酶切为所需大小，为保证优质稳定的片段化效果，片段化过程请于冰上操作。

5. 该酶在高温条件下即可失活。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

DNA片段化（DNA Fragment）

该步骤将基因组DNA片段化。

1. 将表2中试剂解冻后，颠倒混匀，置于冰上备用。

2. 于冰上配制表2反应体系。

表2  DNA片段化 PCR反应体系

3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀，并短暂离心将反应液离心至管底。

4. 将上述PCR管置于PCR仪，设置表3所示反应程序，进行DNA片段化反应。

表3  DNA片段化 PCR反应程序

【注】：*DNA片段化过程为有效控制片段化效果，避免过度酶切，反应程序可预先设置4℃，待模块温度降至4℃时，将PCR管放入PCR仪即可。**对于完整的基因组DNA，酶切时间参考表1。

5. 产物如需纯化，可使用Hieff NGS® DNA Selection Beads（Cat#12601）或AMPure XP Beads（Cat#A63880）或其他等效产品。

参考实例

使用Hieff ® Smearase对Human gDNA样本进行酶切，片段化结果见图1。

图1  Hieff ® Smearase酶切200 ng Human gDNA样本（不同酶切时间片段化效果检测）