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Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit
产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格(元)
Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit
YB018P
50 T
1453.00
Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit
YB018P
200 T
5493.00
Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit
YB018P
1000 T
21282.00
Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit
YB018P
10000 T
168882.00
Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中,逆转录和定量PCR在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险。
本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA,并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的MP Buffer,Enzymes Mix等,缓冲液中已含有Mg2+和dNTP等,并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子,能够在保证引物扩增效率的同时,进行多达四重的反应。
组分编号
组分名称
产品编号/规格
YB018P (50 T)
YB018P (200 T)
YB018P (1000 T)
YB018P (10000 T)
11147-A
2×Hifair® V MP Buffer
500 μL
1 mL×2
10 mL
100 mL
11147-B
Hifair® V Enzyme Mix
50 μL
200 μL
1 mL
10 mL
11147-C
RNase Free H2O
500 μL
1 mL×2
10 mL
100 mL
【注】1) 2×Hifair® V MP Buffer为Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的简写。
2) Hifair® V Enzyme Mix主要包含有耐热Hifair® V Reverse Transcriptase和UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。
需添加High Rox适用机型: ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™
需添加Low Rox 适用机型: ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
不需要Rox校正的仪器型号:
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。本品避免反复冻融。建议分装保存。
1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
反应体系(以20 μL为例)
组分
体积(μL)
终浓度
2×Hifair® V MP Buffer
10
1×
Hifair® V Enzyme Mix
1
-
Primer Mix (10 μM)
各0.4
0.2 μM
Probe Mix (10 μM)
各0.2
0.1 μM
模板 RNA
Total RNA 1 pg-1 μg
-
RNase Free H2O
to 20 μL
-
【注】:使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。
a) 引物浓度:Primer Mix中包含多对引物,通常每条引物终浓度为0.2 μM,也可以根据情况在0.1-1.0 μM间进行调整。
b) 探针浓度:Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。
c) 模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用,控制Ct值在20-35之间适宜。
d) 反应体系:推荐使用20 μL或50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
e) 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
反应阶段
温度
时间
循环数
1
逆转录
50℃a
15 min
1
2
预变性
95℃
30 sec
1
3
扩增反应
95℃
10 sec
45
60℃b
30 secc
【注】
a) 逆转录:对于一些复杂模板或者高GC含量的RNA模板,可将逆转录温度调整至55℃,有利于提高扩增效率。
b) 扩增反应:扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。
c) 荧光信号采集:不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同,请根据最短时间限制进行设置。
产品描述
产品组分
适用机型
运输与保存方式
注意事项
标准扩增程序
部门 |
姓名 | 手机 | |||
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86-21-60514606
技术: 4006-871-227
传真: 021-37680378
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- CTP (100 mM) 胞苷三磷酸溶液(100 mM)...
- ATP (100 mM) 腺苷三磷酸溶液(100 mM)...
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