dCas9 Nuclease - 基因编辑 - 分子生物学 - 产品中心 - 上海钰博生物科技有限公司

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钰博生物通过对Cas9经过点突变（D10A和H840A突变）获得dCas9（deactivated Cas9）。不同于Cas9，dCas9仅有结合靶标DNA的能力，不能切割靶标DNA，可用于转录水平调控研究（体内）。在体外，dCas9可以用来调取特异靶标序列，可用于后续的实验研究。与Cas9一样，dCas9的反应体系也需要添加RNA（sgRNA或者crRNA:tracrRNA），因此，整个体系（包括Cas9酶）都不能含有任何核酸酶。

产品组成

产品编号	组分名称	产品货号（规格）
产品编号	组分名称	YB002J	YB002J
11351-A	dCas9 Nuclease	100 pmol	500 pmol
11351-B	10× dCas9 Nuclease Reaction Buffer	0.5 mL	2.5 mL
11351-C	Control Target DNA	2 rxns	10 rxns
11351-D	sgRNA	2 rxns	10 rxns

运输与保存方法

干冰运输。-80ºC保存，2年有效。

注意事项

sgRNA容易降解，保存于-80ºC；其余组分可保存-20ºC。

使用方法

在无菌微量离心管中配制以下反应体系：

组分	30 μL反应体系
Nuclease-free water	20 μL
10X dCas9 Nuclease Reaction Buffer	3 μL
300nM sgRNA	3 μL (30 nM final)
1 μM dCas9 Nuclease	1 μL (~30 nM final)
Reaction volume	27 μL
Pre-incubate for 10 minutes at 25⁰C
30 nM substrate DNA	3 μL (3 nM final)
Total reaction volume	30 μL
Incubate at 37 °C for 1 hour and proceed with fragment analysis