DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化学感受态细胞

产品信息

产品描述

本品是采用DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化，广泛适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传，适用于蓝白斑筛选。DH5α细胞重组酶recA1和核酸内切酶endA1基因缺失突变使其能保证克隆DNA的稳定性。使用pUC18质粒检测，转化效率约达10⁸ cfu/μg DNA。

DH5α细胞基因型：F ^- φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-argF) U169 endA1 recA1 hsdR17 (r_k^-,m_k⁺ )supE44 λ- thi-1 gyrA96 relA1

产品组分

运输与保存方法

干冰运输；DH5α 感受态细胞-80℃保存，有效期6个月。请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

注意事项

1. 本产品应保存在-80℃，不可反复冻融，以免降低感受态细胞的转化效率。

2. 本产品在冰中解冻时间不宜过长，感受态细胞刚化冻时转化效率最高。

3. 蓝白斑筛选时，需在平板上预先涂布 IPTG和X-gal。

使用方法

1. 取100 μL感受态细胞，冰浴、解冻。

注：感受态细胞的建议用量为50-100 μL，解冻后的感受态细胞不建议二次使用。

2. 立即向解冻后的感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻弹匀，冰浴静置30 min。

注：所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

3. 42℃水浴中热激90 s，然后快速将EP管转移到冰上，静置2 min。

4. 向感受态细胞中加入900 μL左右不含抗生素的LB或SOC培养基，混匀。置于37℃摇床温育45 min。

5. 取不同体积的转化产物，涂布至培养板中，37℃培养12-16 h。