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X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷
X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷
Product Introduction

X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

YB012K

1 g

426.00

X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

YB012K

5×1 g

1746.00


产品描述

X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。基于这个特点,当pUC系列载体DNA以lacZ 缺欠细胞作为宿主进行转化时,或M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在培养基中加入X-Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色而方便地挑选择出基因重组体。
常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。


运输与保存方法

冰袋运输。-20 ℃避光保存。


产品性质

中文名称(Chinese Synonym)

5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷

英文名称(English Synonym)

5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside;

5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside

CAS号(CAS NO.)

7240-90-6

分子式(Molecular Fomular)

C14H15BrClNO6

分子量(Molecular Weight)

408.63 g/mol

外观(Appearance)

白色至浅黄色粉末

纯度(Purity)

>99%

溶解性(Solubility)

溶于DMSO,溶解度可达20mg/mL。也溶于DMF。

结构(Structure)

1.bmp 


注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;

2)含有 X-Gal 的培养基 4℃避光保存,须在1周内使用。


配制储存液

称取200 mg X-Gal于15 mL 离心管,向其中加入10 mL DMF,旋涡震荡使其充分溶解后于-20℃避光保存,正确操作下,有效期可达5-12个月,如小量频繁使用,建议分装成1 mL/管后避光冻存。

蓝白斑筛选

1. X-Gal、IPTG 加入琼脂培养基溶液

1)高压灭菌已加琼脂的培养基,并冷却到50℃左右。

2)每毫升培养基内加入10 μL 20 mg/mL X-gal溶液、10 μL 0.1 M的IPTG(使其终浓度达到1 mM);

3)加入适量抗生素;

4)混匀后按照平板大小倒入适量培养基,待培养基冷却至室温后,接种细菌于37℃过夜培养。

2. X-Gal、IPTG加到琼脂平板表面

1)于无菌超净工作台制备平板(如LB 琼脂板);

2)取40 μL 100 mM IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合,均匀地涂布于准备好的平板上;
注:平板边缘较难充分涂布均匀,容易产生假阳性,因此,为了得到更好结果,建议后续操作中尽可能在平板中间挑取单克隆。

3)37℃孵育直至所有液体被吸收(30 min或更长)。接种细菌于37℃过夜培养。


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