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T4 RNA Ligase 1 T4 RNA连接酶1
T4 RNA Ligase 1 T4 RNA连接酶1
Product Introduction

T4 RNA Ligase 1 T4 RNA连接酶1

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

T4 RNA Ligase 1  T4 RNA连接酶1

YB018K

1000 U

565.00

T4 RNA Ligase 1  T4 RNA连接酶1

YB018K

10000 U

3465.00 


产品描述

T4 RNA连接酶1是一种ATP依赖的、可催化ssRNA、ssDNA或单核苷酸分子之间或分子内5´磷酸末端和3´羟基末端形成磷酸二酯键的酶,该过程中ATP水解为AMP和PPi。本品来源于携带T4 RNA连接酶1基因的E.coli菌株。


产品应用

1. RNA 3´-末端标记

2. ssRNA和ssDNA分子内或分子间的连接

3. 合成单链寡脱氧核苷酸

4. RNA环化


产品组分

类别

编号

组分

产品编码/规格

储存

11068ES80(1000 U)

11068ES92(10000 U)

Part Ⅰ

11068-A

T4 RNA Ligase (10 U/μL)

100 μL

1 mL

-20℃

Part Ⅱ

11068-B

10× T4 RNA Ligase Reaction Buffer

300 μL

3 mL

-20℃或-80℃

11068-C

ATP (10 mM)

50 μL

500 μL

11068-D

50% PEG 8000

500 μL

5 mL

运输方法

冰袋运输。

保存方法

1. 试剂Part Ⅰ:-20℃保存,避免反复冻融。

2. 试剂Part Ⅱ:-20℃保存,1个月。-80℃,长期保存。避免反复冻融。

单位定义

37℃条件下,30 min内将1 nmol的5´-[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶量为1个酶活单位。


注意事项

可根据具体应用选择合适的操作方法,可能需准备额外的试剂,如RNase inhibitor (钰博生物,Cat No.10603)。


操作方法

一、用于RNA环化

1. 配制反应体系(20 μL反应体系)

在RNase free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。

组分

加入量

终浓度

10× T4 RNA Ligase Reaction Buffer

2 μL

50% PEG 8000

4 μL

10%

ATP (10 mM)

0.04-0.1 μL

20-50 μM

RNase inhibitor (40 U/μL)

0.5 μL

1 U/μL

RNA

-

10 μM

T4 RNA Ligase (10 U/μL)

1 μL

0.5 U/μL

Nuclease-free water

Up to 20 μL

-

【注】:1)试剂使用:使用前充分解冻混匀。

2)T4 RNA连接酶添加:建议在最后一步加到反应体系中。

2. 反应程序

1)孵育:25℃ 1-2 h。如果是更长的寡核苷酸,16℃过夜可以增加产量。

2)终止反应:95℃ 2 min或65℃ 15 min。


 部门

姓名

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